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壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行滅菌的三要素包括作用時(shí)間、滅菌溫度及飽和蒸汽等三大要素。

微生物對熱的耐受力因種類而不同，因此根據(jù)滅菌物品污染程度，其所需的滅菌溫度和作用時(shí)間也各不相同，且滅菌溫度和作用時(shí)間的選擇需隨滅菌方式、物品性能、包裝材料、要求滅菌過程長短而定。一般而言滅菌溫度愈高，所需時(shí)間愈短，飽和蒸汽的溫度和其壓力呈恒定的關(guān)系，但當(dāng)柜室內(nèi)的空氣未排除或未*排除，則蒸汽不能達(dá)到飽和，此時(shí)雖然壓力表顯示已達(dá)滅菌壓力，但蒸汽溫度卻并未達(dá)到要求，從而導(dǎo)致滅菌失敗。

壓力蒸汽滅菌的作用時(shí)間，應(yīng)從滅菌柜室內(nèi)大到要求滅菌溫度時(shí)算起，直至滅菌完成為止?？倳r(shí)間包括：

1、熱力穿透時(shí)間，即從滅菌柜內(nèi)達(dá)到滅菌溫度至滅菌物品中心部位也達(dá)到滅菌溫度所需時(shí)間，時(shí)間的長短取決于滅菌物品的性質(zhì)、包裝的大小、放置位置、滅菌柜內(nèi)空氣排空程度等；

2、滅菌維持時(shí)間，即殺滅微生物所需要延長的加熱時(shí)間，一般為維持時(shí)間的一半，其長度視消毒物品而定；

3、預(yù)熱時(shí)間指對滅菌柜室內(nèi)進(jìn)行加熱達(dá)到規(guī)定滅菌溫度的時(shí)間，預(yù)熱可增加柜室內(nèi)干熱的均勻度和防止蒸汽過多冷凝；

4、排除冷空氣時(shí)間為將柜室內(nèi)原有冷空氣排出柜外，二級生物安全柜以加強(qiáng)熱的穿透，這對蒸汽尤為重要，應(yīng)給予充分的時(shí)間;柜室升溫時(shí)間指放入物品后將整個(gè)柜室加溫至滅菌要求溫度的時(shí)間；

5、降溫時(shí)間指在完成消毒或滅菌停止加熱后，柜室溫度下降至可安全開門的時(shí)間。

飽和蒸汽必須滿足干燥(含濕氣<5%>和純凈(含冷空氣<3.5%>，過熱度不應(yīng)*過5℃，因?yàn)轱柡驼羝隼淠尫懦龃罅康臐摕崮?，使物品的溫度上升；而冷凝的同時(shí)，其體積急劇收縮(1/1600)，還可產(chǎn)生局部負(fù)壓，使隨后的蒸汽穿透到物品的深處，對過熱蒸汽，一方面冷凝放緩，不利于滅菌，此現(xiàn)象在過熱5℃以上時(shí)即表現(xiàn)明顯。另外，蒸汽過熱可導(dǎo)致物品快速老化。過熱蒸汽的產(chǎn)生可因輸氣系統(tǒng)或規(guī)定的壓力明顯下降，或夾套中溫度較高或紡織品過于干燥。當(dāng)蒸汽中含有較多細(xì)微霧等，形成氣體流動(dòng)的屏障而不于熱的穿透，同時(shí)也會(huì)增加滅菌后干燥處理的難度。霧粒的存在主要因在加水過多的鍋爐中表面水泡迸裂被快速蒸汽帶出，或蒸汽通過較長管道冷凝而成。當(dāng)蒸汽中混入空氣其壓力和溫度間的關(guān)系與飽和蒸汽時(shí)的有所偏差，此時(shí)壓力表中所示壓力值應(yīng)扣除空氣的分壓，也即其所能達(dá)到滅菌溫度也會(huì)相應(yīng)下降，如不注意這一點(diǎn)，由于未達(dá)到滅菌溫度而導(dǎo)致滅菌失敗。高壓蒸汽滅菌器蒸汽中混入的空氣可因輸氣系統(tǒng)，柜室內(nèi)原有的空氣或滅菌物品內(nèi)部的空氣未排除所產(chǎn)生，該空氣的存在，還因?yàn)榭諝馐苷羝麛D壓形成空氣氣團(tuán)，阻隔蒸汽接觸滅菌物品，從而影響蒸汽向滅菌物品內(nèi)部的穿透，形成包內(nèi)溫度低，包外溫度高的溫度不勻的情況，致使內(nèi)部不能達(dá)到滅菌溫度；同時(shí)由于空氣的存在，減少了滅菌室內(nèi)氣體的含水量，即濕度水平的降低，不利于微殺物的殺滅。