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PCR儀的使用步驟及原理
更新時(shí)間:2022-10-11   點(diǎn)擊次數(shù):3547次

PCR儀是為滿足當(dāng)今分子生物實(shí)驗(yàn)室的需求所設(shè)計(jì)。高品質(zhì)的光學(xué)器件、可靠的溫度控制系統(tǒng)及嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝確保儀器可靠性、精度和準(zhǔn)確度。PCR儀主要功能包括多通道 PCR 檢測(cè),熔解曲線及數(shù)據(jù)分析管理等。儀器可以使用條形管或單個(gè) PCR 管進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。

PCR儀的操作步驟:

1、準(zhǔn)備好樣品,分別分裝于200微升的離心管里;

2、接通PCR儀的電源,打開PCR儀的開關(guān),使儀器初始化;

3、打開儀器的加熱板,放入需要進(jìn)行反應(yīng)的樣品;

4、從儀器主頁面中選擇自己的使用文件夾;

5、選擇合適的運(yùn)行程序,點(diǎn)擊開始按鈕;

6、根據(jù)實(shí)際離心管里的裝樣量設(shè)置相應(yīng)的體積參數(shù)(50-100微升);

7、再次確認(rèn),點(diǎn)擊開始,程序就開始運(yùn)行了。等待程序運(yùn)行結(jié)束,取樣即可!

PCR儀的原理是:PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。開始時(shí),探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,檢測(cè)不到熒光信號(hào);PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。


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