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12bit與16bit在圖像分辨上的區(qū)別
更新時(shí)間:2017-02-27   點(diǎn)擊次數(shù):4527次

 對(duì)動(dòng)態(tài)范圍進(jìn)行量化需要一個(gè)運(yùn)算公式,即動(dòng)態(tài)范圍值 = 20 log (well depth/read noise),其中Well depth代表是滿井電子,是CCD飽和時(shí)能接受的電子信號(hào)總值,read noise是讀出噪聲(以電子數(shù)來(lái)表示),每個(gè)CCD在讀數(shù)的過(guò)程中都會(huì)產(chǎn)生噪聲,噪聲越小,監(jiān)測(cè)靈敏度越高。其中滿井電子與CCD的bit值是相關(guān)的,通常下,bit值越高,滿井電子的數(shù)值越大。


舉例如下:
Well depth = 85,000 個(gè)電子, read noise = 12 個(gè)電子
Dynamic range = 20 log (85,000/12), or 77dB.
動(dòng)態(tài)范圍的值越高CCD性能越好.

(3)、量子效率  
    CCD的量子效率也稱(chēng)像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢(shì)阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。不同結(jié)構(gòu)的CCD其量子效率差異很大。比如100光子中積累到像素勢(shì)阱中的電荷數(shù)是50個(gè),則量子效率為50%(100 photons = 50 electrons means 50% efficiency)。值得注意的是CCD 的量子效率與入射光的波長(zhǎng)有關(guān)。

(4)、信噪比
    說(shuō)到信噪比就不得不提到暗電流了,
暗電流是導(dǎo)致CCD噪音的很重要的因素。暗電流指在沒(méi)有曝光的情況下,在一定的時(shí)間內(nèi),CCD傳感器中像素產(chǎn)生的電荷。我們?cè)谧龌瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)的時(shí)候,需要的曝光的時(shí)候比較長(zhǎng),這樣導(dǎo)致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對(duì)圖像的質(zhì)量影響非常大。通常情況下通過(guò)降低CCD的溫度來(lái)較為大限度的減少暗電流對(duì)成像的

    影響。CCD產(chǎn)生的暗電流隨著溫度下降而減少,但是在-23℃下開(kāi)始趨于平緩,由此可以得出溫度并非需要無(wú)休止的降低的。所以在選擇冷CCD時(shí),溫度在-25℃(溫度,非室溫以下)下一般就可以達(dá)到您的要求了。
    有的CCD是在圖像較為終生成后,通過(guò)軟件去背景來(lái)扣除暗電流,對(duì)于信號(hào)遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于背景的有一定效果,但是對(duì)于弱信號(hào)處理過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生越來(lái)越多的錯(cuò)誤。

    
 (5)、光學(xué)鏡頭
    光學(xué)鏡頭是機(jī)器視覺(jué)系統(tǒng)中*的部件,直接影響成像質(zhì)量的優(yōu)劣,影響算法的實(shí)現(xiàn)和效果。光學(xué)鏡頭規(guī)格繁多,有時(shí)不免頭暈。光學(xué)鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長(zhǎng)焦鏡頭;從視場(chǎng)大小分有廣角、標(biāo)準(zhǔn),遠(yuǎn)攝鏡頭;結(jié)構(gòu)上分有固定光圈定焦鏡頭,手動(dòng)光圈定焦鏡頭,自動(dòng)光圈定焦鏡頭,手動(dòng)變焦鏡頭、自動(dòng)變焦鏡頭,自動(dòng)光圈電動(dòng)變焦鏡頭,電動(dòng)三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。

(6)濾光鏡片
    熒光:EB 、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Red、SYPRO Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、熒光板等
   (要根據(jù)具體的激發(fā)光源和濾鏡來(lái)決定)


光源

激發(fā)波長(zhǎng)

吸收波長(zhǎng)

染料

Blue

475nm

537nm

SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Orange、Cy2等

Green

534nm

606nm

SYPRO Red、Cy3等

Red

632nm

609nm

Texas Red、Rhodamine Red 、Cy5等

 

凝膠成像系統(tǒng)特點(diǎn)

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定時(shí)關(guān)機(jī):用戶可自行設(shè)定定時(shí)關(guān)閉紫外光源的時(shí)間

拍攝范圍:較為大成像面積21cm×26cm

光源:多個(gè)輔助光源包括紫外透照,白光透照,紫外反射,白光反射等

主要功能:

  1.凝膠圖像剪輯處理,標(biāo)記;

  2.自動(dòng)尋找凝膠條帶;

  3.與公用的標(biāo)準(zhǔn)條帶或自選的標(biāo)準(zhǔn)條帶比較;

  4.條帶(泳道)遷移路徑的校正;

  5.核酸、蛋白的處理,計(jì)算相應(yīng)的分子量等數(shù)值;

6.詳細(xì)的分析結(jié)果可輸出成EXCEL格式,根據(jù)需要編輯。

適用范圍:

從整體總的來(lái)說(shuō)凝膠成像(系統(tǒng))可應(yīng)用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析

 ?。?)分子量定量

  對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。

 ?。?)密度定量

  一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。

 ?。?)密度掃描

  在分子生物學(xué)和生物工程研究中,我們較為常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法就是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。

 ?。?)PCR定量

PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條,那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類(lèi)似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

 

凝膠成像的分類(lèi):

 (1)普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對(duì)蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測(cè);以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見(jiàn)樣品成像);

  (2)化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像;

 ?。?)多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像;

 ?。?)多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像和離體組織和小型動(dòng)物,及大型型動(dòng)物。    

較為后是品牌推薦:

  進(jìn)口品牌美國(guó)的市場(chǎng)上見(jiàn)的是相對(duì)比較多的有:UVP、伯樂(lè)、alpha、SIM、KODAK、GE、Wealtec等;德國(guó)品牌主要有:Royal、Raytest等;英國(guó)品牌:UVI、Fedbio等;以色列DNR;荷蘭Isogen等等。目前這些國(guó)內(nèi)進(jìn)口品牌和國(guó)產(chǎn)品牌的差不多,但是價(jià)格肯定是高于國(guó)產(chǎn)品牌。

中國(guó)本土企業(yè)也掌握了凝膠成像核心技術(shù),性能方面不比進(jìn)口差,價(jià)格又比進(jìn)口的低,本土的品牌大致上可見(jiàn):北京六一、君意東方、上海領(lǐng)成、上海培清、上海山富、上海復(fù)日、上海嘉鵬、上海勤翔、江蘇捷達(dá)等品牌。

上海旦鼎國(guó)際貿(mào)易有限公司

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